ctab提取dna流程图_CTAB法提取DNA，pcr扩增，聚丙烯酰胺凝胶电泳

发苗2～3周，剪取幼苗

磨样：液氮冷冻，打样机30s

添加DNA提取液400 微升CTAB

水浴锅65 °C     震荡  40 分钟(图：金属浴)

再加等体积24:1氯仿/异戊醇

摇床摇30分钟

离心12000rpm   10 min

成果

吸取上清液至1.5ml离心管

加入酒精上下颠倒，

成果↓可以看见白色沉淀既DNA

12000rpm   3min，酒精洗涤两次

吹干(一般 吹一夜)

加超纯水50微升稀释成母液

测浓度↓工作液浓度100~200纳克每微升

计算：10微升体系，左右引物各0.3,mix   dd H₂o5,   DNA1, mix3.4      单位微升?         

加石蜡一滴

材料冰中暂存

准备超纯水，枪头，marker，根据引物数量计算，混合于两毫升试管，九十六孔板，离心

   继续pcr  94°预变性94°变性，退火58 °30s，72°延伸5min   变性至延伸35个循环

加loadingbuffer   1微升后  离心