Phenotypic Characterization of Retinoic Acid Differentiated SH-SY5Y Cells by Transcriptional Profili

Phenotypic Characterization of Retinoic Acid Differentiated SH-SY5Y Cells by Transcriptional Profiling
（PLOS one 3区 荷兰神经科学研究所）
摘要：在这里，我们结合基因本体论、转录因子和分子通路分析，利用基因组宽转录谱研究视黄酸(RA)分化SH-SY5Y细胞的分子表型。我们证明RA在SH-SY5Y细胞中诱导了一般的神经分化程序，这些细胞形成了一个主要成熟的daergic样神经递质表型。这种表型的特征是多巴胺水平的增加，以及其他神经递质表型的大量抑制，如去甲肾上腺素、乙酰胆碱、谷氨酸、血清素和组胺。此外，我们还发现RA分化的SH-SY5Y细胞表达多巴胺和去甲肾上腺素神经递质转运体，它们负责MPP(+)的摄取，这是一种众所周知的DAergic细胞毒物。MPP(+)治疗根据其在多巴胺能神经元中的细胞毒性作用改变线粒体活性。
介绍：PD模型应具有以下特点
1、 具有多巴胺能神经元主要的细胞和分子特征；
2、 对于PD有关的细胞扰动敏感；
3、 适用于细胞的大规模筛选，可对多种基因、蛋白和化合物的功能进行高通量、高含量的检测。
RA诱导分化的SY5Y细胞的特异性神经递质表型尚不清楚。但RA诱导的SY5Y的TH活性增加，表明有向多巴胺神经递质表型转变的趋势。在这里，我们结合基因本体论和通路分析，采用大规模的转录谱分析来确定SH-SY5Y细胞的分子表型。然后我们使用高含量显微镜、ATP产生和线粒体膜电位测量来评估RA分化的SHSY5Y细胞在MPP(+)作用下的线粒体丰度和线粒体活性。我们的观察表明SH-SY5Y细胞具有DAergic细胞特有的分子表型，是研究pd相关线粒体抑制对细胞活力和功能影响的合适模型。
材料和方法：F-12DMEM，无L-谷氨酸胺，0.5%FBS，生长于涂有0.1mg/ml的多聚赖氨酸和1mg/ml不含苯酚红的生长因子还原基质的96孔板里，10000cells/孔。分为两组，一组加RA，另一组只加培养基。
明天7.40飞武汉，参加“2019中国脑科学与神经调控技术发展高峰论坛暨CP物理诊疗技术百场培训学术年会”。