【Front. Plant Sci.】同时对三个PPO基因进行CRISPR/Cas9编辑可减缓茄子果肉褐变

文章信息

题目：Simultaneous CRISPR/Cas9 Editing of Three PPO Genes Reduces Fruit Flesh Browning in Solanum melongena L.

刊名：Front. Plant Sci.

作者：Alex Maioli, Silvia Gianoglio et al.

单位：University of Torino

Published Date:03 December 2020‍

摘要

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多酚氧化酶(PPO)可催化多酚的氧化，进而导致茄子果肉在切开后褐变。这对茄子产业化和果实质量都有负面影响。由于最近获得了高质量的基因组序列，在茄子中鉴定出十个PPO基因（命名为SmelPPO 1-10）。采用基于CRISPR/Cas9的诱变方法敲除三个靶PPO基因（SmelPPO4、SmelPPO5和SmelPPO6，因为其在切割后的果实中显示出较高的转录水平）。茄子子叶的优化转化方案用于获得其中 Cas9指向三个PPO基因共享的保守区域的植物。目标位点扩增子的 Illumina深度测序证实了体外再生植株的SmelPPO4、SmelPPO5和SmelPPO6基因座的成功编辑。诱导突变在T1和T2中稳定遗传子代，并与切割后浆果果肉的PPO活性降低和褐变有关。我们的研究结果提供了第一个在茄子中使用CRISPR/Cas9系统进行生物技术应用的例子，并为开发具有低果肉褐变的茄子基因型开辟了道路。

技术路线