Plos biology:水稻根际微生物组时间序列分析

加州大学戴维斯分校的博后Joseph Edwards (https://scholar.google.co.jp/citations?user=aPHqjO4AAAAJ)继2015第一作者发表水稻根际微生物组PNAS(两年引用222次)后,目前在预印本bioRxiv上发表了题目为《水稻根际微生物组时间序列分析》的文章。大家看图有多漂亮,就知道肯定又是一篇大作。

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原标题:Compositional shifts in the root microbiota track the life-cycle of field-grown rice plants

文章通讯作者为Venkatesan Sundaresan教授 (http://www-plb.ucdavis.edu/Labs/sundar/),水稻微生物组只是他们组研究方向之一,虽然文章不多,但质量很高,值得关注。

摘要

根际细菌群落与植物营养与健康相关。己到有多种因子影响根系微生物组成,但水稻微生物群落形成和动态变化仍然未知。使用水稻在两地和三个连续生长季观测微生物组并分析。在营养生长阶段微生物高动态化,接下来组成稳定。随机森林方法鉴定了不同地点年龄阶段保守的物种。年龄预测模型表明干旱推迟微生物组形成。微生物组与发育转换更相关,而不是年龄。本文展示了植物生命中连续的生活中存在微生物组动态规律的变化。

背景

根相关的微生物组可以分为三个空间显著不同的区域:土壤与根临近处的根际(rhizosphere)、根表面(rhizoplane)和根内(endosphere)。它们与非种植土存在显著差异,暗示着根富土壤中部分微生物。这个富集的过程,和植物生活史中动态的发育仍然未知。

人类己经有从婴儿到成年的队列研究。新生儿低多样性,随着年龄增加而增长。在前三年快速变化,且形成成人样式微生物,与良好饮食相关。

结果

  • 实验设计与测序

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图1. 根系微生物组在种子萌发8-9周后趋于稳定

A. 基于Bray-Curtis距离的主坐标轴分析(PCoA)展不同根部差异。
B. 按地点着色A图。
C. 展示PCoA的1/3轴,按年龄连续着色。
D. 热图展示不同生育时间点间的Bray-Curtis相似度的z-scores值。

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图2. 随着时间变化增长和减少的门

A. 柱状图展示最高丰度的11个门(变形菌分为4纲)各样品在两个地区、不同compartment的变化。
B. 各菌门根外比根内beta回归系数(regression coefficient),增加大于0,减少小于0。
C. 每个菌门和compartment在不同季节中变化回归系数。

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图3. 随机森林模式检查物种可准确预测植物年龄。

A. 基于松散RF模式和2014/5季数据预测植物年龄,每个点代表预测的年龄值。
B. 使用Joyplot展示年龄特异的OTUs在时间上丰度变化,随时间下降(蓝)、上升(黄)、复杂样式(灰)
C. 不同地点年龄特异菌的相对丰度。

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图4. 干旱处理可以延迟内生菌形成

A. 干旱处理下菌群年龄偏低。
B. 干旱下一致上升、下降或复杂模式。

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图5. 植物年龄增长使根际、根内群落更相似。
A. 组内Bray Curtis相似内在不同时间点和Compartment中分布
B. 每个时间点地点特异的OTUs相对丰度

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图6.品种存在差异的微生物组发育模式。

A. 不同品种不同时间点的发育程度。
B. PCoA展示compartment和年龄是群落结构的主要决定因素。
C. 年龄差异主要PCoA2轴分开
D. 预测年龄
E. 各品种时间变化菌

附图

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附图1. 微生物组在多个地点和季节保持稳定。
A. 热图展示各时间点内California地区相似度。
B. 热图展示Arkansa地区相似度。

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附图2. 增加、减少和复杂样式OTUs不同

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附图3. 增加、减少和复杂样式OTUs不同。

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附图4. 土壤群体并没有随着时间相似增加

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附图5. 不同compartment相应不同时间点下OTUs数量

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附图6. 加州2016年样品预测

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附图7. 采用随机森林对门和目在不同阶段的分布分析

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附图8. Arkansas 2016地块布局

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附图9. 加州2016地块布局

时间序列分析相关方法

序列处理、OTU聚类和过滤

采用自编写的Python对样品按barcode进行拆分,

详见作者github提供的代码

git clone https://github.com/bulksoil/LifeCylceAnalysis

但实际作者只传了两个子图的代码,而且测试数据也不全,最近更新是在10月前,希望文章正式发表后可以共享。

Reference

Edwards, J., et al. (2017). “Compositional shifts in the root microbiota track the life-cycle of field-grown rice plants.” bioRxiv: 166025. https://www.biorxiv.org/content/early/2017/07/19/166025

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