鉴定脂肪组织巨噬细胞（ATM）分泌外泌体

鉴定脂肪组织巨噬细胞（ATM）分泌外泌体

鉴定ATM能否分泌外泌体:

为了确认脂肪组织巨噬细胞（ATM）是否可以外泌体，从肥胖野生型小鼠的内脏脂肪组织（VAT）中分离出脂肪组织巨噬细胞(ATM)（CD11b+F4/80+），并培养72小时，电子显微镜和纳米观察分析（图）显示，通过超速离心分离的颗粒含有丰富的ATM分泌的胞外小泡，其直径为30-100 nm。这些EV的密度梯度超速离心分析证实，它们主要由Exos组成，通过外体特异性蛋白标记物TSG101、syntenin1、CD63等的表达得到证明，主要以图表示。

超速离心分离外泌体

电镜观察外泌体典型杯状囊膜结构

NTA分析外泌体的粒径和浓度表征

Westernblot鉴定TSG101等外泌体蛋白标志物

外泌体跟踪

室实验仅能证明上下两室的两种细胞之间确实发生了物质运输传递，接下来，通过外泌体跟踪测试这些ATM分泌的外泌体是否可以被脂肪细胞吸收。从ATM细胞提取外泌体，加上PKH26标签，添加到3T3-L1脂肪细胞培养基中，12h后，在细胞里面观察得到红色的带PKH26标签的外泌体。

标记物

胆囊癌血浆外泌体microRNAs标记物

唾液外泌体肿瘤标记物

前列腺癌的外泌体标记物

稳定分泌近红外荧光标记外泌体

CD63-EGFP标记的外泌体

外泌体标记物CD63,CD8