靶向代谢实验方法及检测报告模板

质谱检测项目报告

目录

ref="知乎 - 有问题，就会有答案">第一部分 项目信息

="知乎 - 有问题，就会有答案">1. 项目内容

ref="https://知乎 - 有问题，就会有答案">第二部分 材料与方法

="知乎 - 有问题，就会有答案">1.仪器和试剂

ref="知乎 - 有问题，就会有答案">2.方法

2.1 样品前处理

2.2 仪器参数设置

"https://zhuanlan.zhihu.com/p/643602953/edit#_Toc33662211">2.3 数据分析

第一部分 项目信息

1. 项目内容

根据客户提供的8例样本提供如下的技术服务：

1）通过有机沉淀提取代谢物

2）采用LC-MS法进行在负离子模式下靶向代谢物质检测、定量

第二部分 材料与方法

1.仪器和试剂

Instruments and reagents	Producer
超高压液相（Agilent 1290）	Agilent Technologies
三重四极杆质谱（Agilent 6470）	Agilent Technologies
色谱柱（Waters Atlantis T3 3μm 4.6x150mm）	Waters
甲醇（Methanol）	Merck (Darmstadt, Germany)
超纯水（Ultrapure water）	Merck (Darmstadt, Germany)
甲酸铵（ ammonium formate）	CNW (Shanghai, China)

2.方法

2.1 样品前处理

血清

用甲醇配制内标，终浓度为18ug/ML

1) 样品4℃解冻，取涡旋10S，取100ul于1.5mL EP管中

2) 加入300ul含内标甲醇，涡旋60S,

3) 17000g，离心15分钟，取上清经0.22μm有机膜滤头过滤，上机

粪便样品

1) 配制75%甲醇水，含13.5ug/ML内标

2) 样品4℃解冻，搅匀，取20mg于1.5mL EP管中

3) 加入800ul 75%甲醇水，涡旋60S

4) 17000g，离心15分钟，取上清经0.22μm有机膜滤头过滤，上机

2.2 标曲配制

1) 配制75%甲醇水，含13.5ug/ML内标

2) 称取一定量的标准品，以75%甲醇水（含内标）为溶液溶解标准品，对比稀释成特定浓度

2.3仪器参数设置

流动相条件：

1. 柱温30℃，上样量2μl

2. 正离子模式：A：5mM甲酸铵溶液；

B：甲醇

流动相洗脱梯度表：

质谱条件：

Agilent 6490 QQQ质谱仪基于MRM模式，进行一级、二级质谱数据采集，采用负模式采集，ESI离子源参数设置如下： 离子源干燥气温度（Gas Temp ) ：180°C，氮气流量（Gas Flow ）：14L/min，鞘气流速（SheathGasFlow）：11L/min ，鞘气温度（SheathGasTemp）：350°C；毛细管电压（VCap ）：3000 V。

离子对信息：

物质名称	加合方式	母离子（Prec Ion)	子离子(Prod Ion)	碰撞能CE（V)	备注
内标	[M-H]-	191.02	110.8	30	内标
指标	[M-H]-	88.99	61	4	指标定量离子对
指标	[M-H]-	88.99	45	4	指标定性离子对

2.4 数据分析

1.利用MassHunter Workstation Quantitative分析软件，通过内标法，以标准品响应及对应浓度作标准曲线，计算出样品浓度

项目内容

广州如期生物技术有限公司成立于2016年，始终以探索科学、服务客户为己任；致力于为高校、科研院所、医院、制药企业提供全面、便捷、专业的技术服务和产品。技术方面我们专注于生物医学领域：公司拥有完善的技术服务平台，覆盖分子生物学，转录组学、代谢组学、蛋白组学，表观遗传等多个科研平台。在产品方面，自主研究多种类型科研试剂盒20多项，如：COIP、CHIP、RIP等科研检测试剂盒，较之同类型的进口试剂盒，极大的降低了科研成本。

公众号：如期生物

关注我们，技术难题一号解决！！！