生物工程整理

生物工程的特点：高效性和经济性，清洁和低耗，强调技术设计(优势)，可遗传和可扩散，对人类伦理道德观念有影响(劣势)

基因工程(核心技术)

基因工程分为三大分支：动物基因工程，植物基因工程，微生物基因工程(看受体活细胞目的基因表达系统)
微生物基因工程具有繁殖迅速，结构简单，遗传操作容易等优点，使得其技术成熟，研制周期短，同时可通过发酵大量生产。

基因工程Q&A

• 为什么能接？
  不同生物DNA的化学组成相同，空间结构相同都是双螺旋结构。
• 为什么需要导入？
  借助活细胞的代谢能力，使目的基因的遗传信息得到表达。
• 为什么需要筛选?
  DNA分子成功导入的概率极低。
• 筛选用什么培养基?
  用选择培养基，固体培养基
• 为什么能表达？
  因为不同生物都遵循中心法则，且共用一套密码子

基因工程的基本过程

获取目的基因

方法：从生物体细胞中分离或化学方法人工合成
工序：先基因定位，再运用限制酶从DNA分子长链中切取这段基因

目的基因与运载体重组

最重要的步骤
3个工具：限制酶，DNA连接酶，运载体
使用运载体的原因：外源基因无法直接进入另一种生物细胞，外源基因会被细胞内的核酸酶分解。
运载体的要求：能稳定存在，能自主复制，有标记基因，有多个限制酶单一切点
最常用的运载体是细菌质粒 或是各种DNA病毒
植物细胞一般用农杆菌转化法
大肠杆菌加CaCl₂，增加细胞壁通透性后再导入。
动物细胞用显微注射法

重组DNA分子导入受体细胞

原因：借助活细胞的代谢功能，才能使目的基因所蕴含的遗传信息得到表达。
质粒可以在受体细胞中自主复制，或是接合到染色体DNA上进行同步复制
动物基因工程受体细胞通常为动物的受精卵，用显微注射的方法将目的基因倒入动物受精卵中，再使其发育成个体而获得转基因动物。

筛选含目的基因的受体细胞

原因：重组DNA分子导入受体细胞的概率极低
筛选只能用稀释涂布法，便于分离纯化
鉴定是否成功导入分为分子水平以及个体水平
分子水平：用探针看是否有mRNA及目的基因，用免疫学反应鉴别蛋白质。
个体水平：用性状鉴定。

转基因产品的安全性

• 转基因生物对生态环境造成不利的影响：
  • 具体途径：通过传粉与野生种杂交，产生具有生存优势的杂交种，影响生物的多样性(三个层次都有)
  • 杜绝方法：对栽培地周围的环境实行严格的控制和监测，以杜绝通过转基因技术产生的基因向其他生物扩散。
• 转基因生物对人体健康造成不利的影响：
  • 具体途径：转基因食品中可能含有致敏物质，会影响人类的健康
  • 杜绝方法：上市前对有可能产生致敏物质的转基因食品进行致敏性检验，以醒目的标签表明产品具有潜在致敏物质，消费者有知情权

细胞工程

植物组织和细胞培养技术

• 植物组织培养技术

• 原理：植物细胞全能性
• 将无菌的外植体接种在含有营养物质和植物激素等的培养基中进行无菌培养，使其形成芽，根并发育成完整植株的技术
• 预备阶段：选用幼嫩的、正在进行细胞分裂的组织或器官，并有大量来源的材料作为外植体进行表面消毒
  常用MS培养基，还需加入植物激素或其类似物。