朋友们的生信作业

先看看他们的作业,这应该是最基本的生信查找内容,估计老师们之间用的都是一个内容

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顺着做吧

  •  找个蛋白

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 该同学选择TFRC蛋白,直接在NCBI的Gene搜索,进去下拉,就能看到基因组和相应基因位置

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99f95e6093434fcabb3d65e54d2bcef3.png

 找一个这个基因的Genbank

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 出现这个页面

cc3a323ec996436cb88547152138acef.png

 直接在Send to下载Coding Sequences,核酸和氨基酸的都下载以免后面要用,格式直接改后缀名就行

7abaf452329e42b6bfaa5d206002a152.png  acc50223b6c848d9b1be7b612ad39a14.png  

往下拉,本作业要的mRNA位置出现了,因为后面要500aa以上,选一个

aad3d36bfa584ba0b2a827cf438e18a9.png

80baf2b2c35c47ce932937ef496d290b.png

  •  蛋白分析

简化一下蛋白名称方便后面操作

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 分析过程参考https://zhuanlan.zhihu.com/p/325789632,我用的Expasy做的组成和疏水性,TMHMM跨膜区分析,结构域用NCBI的CD-Searchhttps://www.ncbi.nlm.nih.gov/Structure/cdd/wrpsb.cgi,二级结构用PSIPRED,三级结构用SWISS-MODEL(三级结构分析教程https://zhuanlan.zhihu.com/p/148266792),这是比较好用的几个

文章直接在Pubmed或者百度学术查

  • 序列比对和进化树

blast后选择需要的序列下载(可以直接把序列号放进去blast,这样能快速得到其他同基因序列)

fe1c46f8ddd04a2fa059d482b16e8113.png

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39963bea51634a468efe45c2ed5d65c3.png

 下载建树需要的得分最高的10种不同物种的序列,将序列文件拖进JalViewdc95de99f8644f5a9b3b359b0a61a8c0.png,使用Mafft进行序列比对(进准度个人认为Mafft>Tcoffee>Clustal>Muscle)

 9522a8203c2243af88bb237938926471.png

 保存比对后的序列(任意可以被建树软件识别的格式)

3fb71cf49d3d4b9e9592a00b708e75ac.png

 调整颜色后输出图片

8d7743a4061b4fc38aebfb800fe2e16b.png

 由于序列较少,进化树直接使用网页版的IQ-TREE(http://iqtree.cibiv.univie.ac.at/,网站加载有点慢,耐心等一下),下图步骤设置好之后下拉填写邮箱然后submit job

cedd3093592543159fa3d78058fabe94.png

 完成后选中项目,点击下载

fc03ec8549884a37ad98ab25b70f6ec7.png

 后缀.treefile是进化树文件

d1fa3ec6593f4c8d91f00772f6a69916.png

 进化树可视化可以选择ChiPlot或者iTOL: Interactive Tree Of Life (embl.de)

这里我用ChiPlot做一个,这个网站内置教程,可自行学习使用

这个网站可以在右边侧边栏美化进化树,也可以导入文件修改进化树

     

新建一个excel,使用重命名功能

在右边栏打开自展值

这样一个基本的进化树就做好了

这个作业上的内容就是这样了

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