展青霉素是苹果汁加工中的一种重要污染物,对人类具有多种毒性。现有的展青霉素解毒方法中,酶是理想的生物解毒剂。
为此,研究人员开发出了一种基于纤维素的磁性纳米材料(MNCC)固定化猪肝脏酯酶(PLE)作为苹果汁中展青霉素(patulin)的可重复使用和有效的解毒剂。
首先是制备磁性纳米晶纤维素(MNCC):通过硫酸水解微晶纤维素,然后与FeCl2和FeCl3的混合溶液反应,添加壳聚糖和三聚磷酸钠(STPP),最后加入氨水,通过磁分离和冷冻干燥得到MNCC。
接下来是固定化PLE(PLE@MNCC):将PLE与MNCC混合,加入饱和硫酸铵溶液,然后加入戊二醛溶液,通过磁分离和冷冻干燥得到固定化酶。
解毒效果的检测:PLE@MNCC在苹果汁中的展青霉素解毒率超过80%,且在8次重复使用后仍保持约50%的初始活性。此外,解毒后的苹果汁质量没有显著不良影响。
稳定性和可重复使用性的检测:PLE@MNCC表现出优越的储存稳定性、可重复使用性和生物相容性。在4°C下储存15天后,PLE@MNCC仍保持较高的活性。在磁性分离后,PLE@MNCC的回收率可达98%。
细胞毒性检测:通过CCK-8实验评估了MNCC、PLE@MNCC以及展青霉素及其降解产物的细胞毒性。结果显示,PLE@MNCC对人类结肠癌细胞(Caco-2)具有良好的生物相容性,且其降解产物的毒性显著降低。
因此,PLE@MNCC作为一种有效、可重复使用、环保且安全的酶剂,为水果汁中展青霉素的解毒提供了一种高效策略。
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