「Hortic Res」CaCIPK3基因正向调控辣椒的耐旱性

文章信息

题目：The CaCIPK3 gene positively regulates drought tolerance in pepper

刊名：Horticulture Research

作者：Zhen-Hui Gong et al.

单位：Northwest A&F University

Published: 01 October 2021

摘要

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干旱胁迫是限制植物生长、发育和生产力的主要农业问题。钙调神经磷酸酶 B 类蛋白 (CBLs) 和 CBL 相互作用蛋白激酶 (CIPKs) 显着影响植物对不同胁迫的反应。然而，CBL-CIPK在辣椒干旱胁迫响应中的分子机制尚不清楚。在此，探讨了CaCIPK3在辣椒 (Capsicum annuum L.) 干旱胁迫调控中的作用。转录组数据和实时定量PCR (qRT-PCR) 分析表明CaCIPK3参与了对多种压力的反应。敲低辣椒中的CaCIPK3增加了对甘露醇和茉莉酸甲酯 (MeJA) 的敏感性。CaCIPK3的瞬时过表达通过增强抗氧化系统的活性和正向调节茉莉酸 (JA) 相关基因来提高耐旱性。CaCIPK3在番茄中的异位表达也改善了干旱和 MeJA 抗性。作为 CaCIPK3 相互作用的伙伴，CaCBL2 正向影响抗旱性。此外，CaWRKY1 和 CaWRKY41 直接结合CaCIPK3启动子以影响其表达。本研究表明，CaCIPK3通过 CBL-CIPK 网络作为抗干旱胁迫的正调节因子来调节 MeJA 信号传导和抗氧化防御系统。

技术路线

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主要结果

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3.1 CaCIPK3的序列、亚细胞定位和进化分析

CaCIPK3编码的蛋白质有440个氨基酸残基，分子量为49.81 kDa。CaCIPK3属于包含零内含子的内含子贫乏进化枝。MSA分析表明CaCIPK3具有CIPK家族的典型结构。NAF 基序位于蛋白激酶结构域和 PPI 基序之间。此外，CaCIPK3 含有跨膜螺旋，表明它可能位于膜上（补充图 S1A）。CaCIPK3的位置和潜在功能研究表明，该基因在CaMV35S启动子和GFP之间融合（补充图S 1B）。载体 (pvbg2307:CaCIPK3-GFP) 在普通烟草中瞬时表达。在整个细胞中观察到对照（pvbg2307：GFP）的表达，而CaCIPK3-GFP蛋白仅在质膜中可见。进行系统发育分析以分析CIPK在许多物种中的进化关系。根据结果，CaCIPK3 与番茄 SlCIPK14 和烟草 NtCIPK14 最相似（补充图 S1C）。

3.2