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题目:Downregulation of a gibberellin 3β-hydroxylase enhances photosynthesis and increases seed yield in soybean
刊名:New Phytologist
作者:Fang Huang,Zhixi Tian,Deyue Yu et al.
单位:Nanjing Agricultural University
日期:09 April 2022
01
摘要
种子产量主要取决于种子数量和种子重量,是大豆育种的主要目标。识别产量相关性状的基因具有重要意义。
通过联合连锁图谱和100粒重的全基因组关联研究,我们克隆了GmGA3ox1,这是一种编码赤霉素3β-羟化酶的基因,它是赤霉素合成途径中的关键酶。
基因组测序鉴定出一种有益的GmGA3ox1单倍型,有助于提高种子重量,大豆转化子进一步证实了这一点。CRISPR/Cas9产生的gmga3ox1突变体显示出较低的种子重量,但通过增加种子数量提高了种子产量。gmga3ox1突变体减少赤霉素生物合成,同时增强光合作用。GmGA3ox1的敲除导致许多光合作用相关基因的上调,特别是编码核酮-1,5-二磷酸羧化酶加氧酶(Rubisco)活性的GmRCA家族。基本亮氨酸拉链转录因子GmbZIP97和GmbZIP159,在gmga3ox1突变体中均上调,并由赤霉素合成抑制剂尤尼康唑诱导,可与GmRCAβ的启动子结合并激活其表达。对2700多份大豆材料的基因组序列分析表明,GmGA3ox1正逐渐用于现代育种。
我们的结果阐明了GmGA3ox1在大豆产量中的重要作用。这些发现揭示了大豆和其他作物未来高产育种的重要线索。
02
技术路线
The soybean (Glycine max (L.) Merr.) materials were used for trait collection
Population phenotyping analysis
Linkage mapping
GWAS
RNA extraction and quantitative real-time PCR (qRT-PCR)
b-Glucuronidase (GUS) staining
Vector construction for Arabidopsis transformation
Overexpression and knockout of GmGA3ox1 in soybean
Transcriptome profiling
Scanning electron microscopy
Net photosynthesis rate, Rubisco activity and sugar contentdetermination
Yeast one-hybrid (Y1H) assays
Luciferase (LUC) transient expression assays
Phylogenetic analysis\Haplotype analysis of GmGA3ox1
03
主要结果
3.1 联合连锁分析和GWAS鉴定与大豆种子重量相关的qSW7-1
我们从184个RIL(来源于KF No.1和NN 1138-2之间的杂交)的二分群体中收集了三种环境中的100粒种子重量数据。100粒种子的重量在不同环境中表现出很大的差异,NN 1138-22的100粒重量高于KF No.2(表S2)。RIL的频率分布呈正态分布(图S1a),表明种子重量是一个复杂的数量性状,由多个基因控制。