二代测序16S扩增子测序 双端测序拼接 如何切取碱基质量切割连接 DADA2 简易概念

==(一些思考记录) DADA2切取示例

个人控制连续三个低于25%的碱基处,的第一个作为分割点

首先要了解自己的测序是可变区的哪几个区,长度多少

切割的保留长度两端加起来应该要大于可变区的长度,具体大多少没有官方说明

最好DADA2进行多次不同位置切割,然后比较table的最小feature

在这里插入图片描述请添加图片描述

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前面要去掉引物 引物去掉也去掉Barcode?请添加图片描述

qiime cutadapt trim-paired \
--i-demultiplexed-sequences 01demux/demux.qza \
--o-trimmed-sequences 01demux/demux_q.qza \
--p-front-f ACTCCTACGGGAGGCAGCAG \
--p-front-r GGACTACHVGGGTWTCTAAT \
--p-cores 16

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16s增子多样性平台是一种用于研究微生物群落多样性的技术。它通过放大16s rRNA因的特定片段,并对其进行,从而可以鉴定出样本中存在的不同微生物种类和丰度。 在选择16s增子多样性平台时,我们需要考虑以下几个因素: 1. 增子选择:不同的16s增子可以放大不同的区域,因此选择合适的增子可以影响到结果的准确性和可靠性。一般来说,常用的增子包括V1-V3、V3-V4和V4-V5等。 2. 平台:目前常用的平台包括Illumina MiSeq、Ion Torrent PGM和454 pyrosequencing等。每种平台的深度和准确性都有所不同,因此在选择平台时需要考虑所需的数据量以及实验预算。 针对数据量的选择,我们需要结合实际需要和预算考虑: 1. 数据需求:根据研究目的和问题的复杂程度,选择适当的数据量可以满足需求。如果只是对样本的一般微生物群落进行初步了解,较小的数据量可能足够。而对于复杂的微生物样本,更大的数据量可以提供更详细的分析信息。 2. 预算限制:不同的平台和数据量对应的费用也是考虑的重要因素。通常来说,费用会随着数据量的增加而增加。因此,我们需要根据实验预算来选择适当的数据量。 总结来说,选择16s增子多样性平台时需要考虑增子的选择以及平台的性能;选择数据量时需要根据实际需求和实验预算进行权衡。

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