本文总结了BSA（Bulked Segregant Analysis）技术在定位基因后，如何缩小候选区间和进行后续验证的方法。包括结合遗传图谱、开发分子标记、RNA-seq结果和相关文献报告。验证方法涉及CAPs、RNA-seq、转基因实验和蛋白质水平检测。同时，通过分析两个高分研究案例，探讨了在BSA结果较大区间时如何通过加密标记和重组事件来精细定位候选基因。
导语：又是一周打工人的开局，小编又来啦，来兑现上一专题说的BSA定位后的缩小候选区间&相关实验内容整理哟~
缩小候选区间的方法总结如下：
☑ 与遗传图谱结果相结合，基于表型数据，进行QTL定位，与BSA结果相结合；
☑ 开发SNP或者InDel分子标记，通过大群体性状与分子标记的共分离缩小候选区间；
☑ 结合RNA-seq结果，选取具有显著差异表达的或某显著富集通路上的基因作为候选基因。
☑ 结合相关性状的文献报告，基于序列同源、基因的功能或者相关突变类型（如EMS），锁定候选基因；
后续验证方法总结有：
☑ 将候选标记转化为CAPs（dCAPs）、凝胶电泳或者一代测序进行验证；
☑ 基于RNA-seq的差异表达分析，看基因是否有显著表达差异；
☑ 转基因验证基因功能，如基因敲除，过表达、RNAi等；
☑ RT-PCR验证候选基因的表达模式。
☑ 蛋白质水平检测基因表达：选择相应的组织以WB等检测目的蛋白的表达。
先来一个科研人员关心的内容吧—看看BSA具体发表的文章，看到这么多IF，是不是眼馋的很，原来BSA小可爱也能发大文章。下面我们一起捋捋，借鉴借鉴吧，也许下个高分文章就是你！
学习高分文章研究思路—做到开题心中有数：
1、如果你的传统定位实验由于标
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