测序深度(Sequencing Depth)是指:测序得到的碱基总量(bp)与基因组(转录组或测序目标区域大小)的比值,是评价测序量的指标之一。
测序深度的计算公式为:
测序深度 = (L × N)/ G
L:读段(reads)长度;N:读段数目;G:测序目标区域大小
覆盖度(coverage)是指测序获得的序列占整个基因组的比例。由于基因组中的高GC、重复序列等复杂结构的存在,测序最终拼接组装获得的序列往往无法覆盖所有的区域,这部分未覆盖的区域就称为Gap。值得注意的是,sequencing coverage指的就是depth of sequencing coverage也就是sequencing depth,反映了一个区域平均被多少个reads测到。
举个例子
假设对一段2000 bp(G:测序目标区域大小)的目标序列进行单端测序,得到1000条reads(N:读段数目),每条reads 200bp(L:读段长度),测序后把所有的reads比对到目标区域后,若2000bp的目标区域中有1800bp的位置至少有1个read覆盖到,而剩余的200bp没有任何read覆盖到,
可见,测序深度与覆盖度是成正相关的。
而不同实验对于测序量的需求,与目标区域的大小、突变类型和疾病