蛋白质定向进化策略

蛋白质定向进化包括随机进化、半理性进化和理性进化策略,用于改善酶的催化效率、稳定性、底物特异性,甚至创造新型蛋白酶。通过体外和体内随机进化方法,如易错PCR、MAGE和MIPE技术,结合计算机模拟和结构分析,实现蛋白质功能的优化。筛选策略包括噬菌体表面展示、酵母表面展示和流式细胞分选技术,广泛应用于生物工程和药物发现。
摘要由CSDN通过智能技术生成

参考:
http://www.pibb.ac.cn/html/2015/2/20140059.htm

定义

蛋白质定向进化的本质是构建分子多样性文库 以及从文库中筛选到性状有改进的突变体,根据 文库构建原理的不同,可分为随机进化、半理性进 化和理性进化三种策略,其大致思路均为由某一靶基因或一族相关的家族基因起始,通过对编码基因 进行突变或重组,创建分子多样性文库;筛选文库 获得能够编码改进性状的基因,作为下一轮进化的 模板;在短时间内完成自然界中需要成千上万年的进化,从而获得具有改进功能或全新功能的蛋白质。

随机进化

蛋白质体外随机进化的一般流程

随机进化方法

  1. 体外随机进化
  • 非重组的体外随机进化
  • 基于重组的体外随机进化
  1. 基于重组的体内随机进化

基于重组的体外随机进化

不同随机进化的基本技术流程

在这里插入图片描述
(a) 易错PCR,改变PCR反应条件,产生随机突变.
(b) 点饱和突变,将模板DNA的特定位点突变为所有20 种氨基酸.
© DNA重组,将一 组同源基因用核酸酶消化,得到

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