参考:
http://www.pibb.ac.cn/html/2015/2/20140059.htm
定义
蛋白质定向进化的本质是构建分子多样性文库 以及从文库中筛选到性状有改进的突变体,根据 文库构建原理的不同,可分为随机进化、半理性进 化和理性进化三种策略,其大致思路均为由某一靶基因或一族相关的家族基因起始,通过对编码基因 进行突变或重组,创建分子多样性文库;筛选文库 获得能够编码改进性状的基因,作为下一轮进化的 模板;在短时间内完成自然界中需要成千上万年的进化,从而获得具有改进功能或全新功能的蛋白质。
随机进化
随机进化方法
- 体外随机进化
- 非重组的体外随机进化
- 基于重组的体外随机进化
- 基于重组的体内随机进化
基于重组的体外随机进化
不同随机进化的基本技术流程
(a) 易错PCR,改变PCR反应条件,产生随机突变.
(b) 点饱和突变,将模板DNA的特定位点突变为所有20 种氨基酸.
© DNA重组,将一 组同源基因用核酸酶消化,得到