有关质粒的相关简述

质粒

质粒(Plasmid)是一种染色体外的稳定遗传因子，大小从1～200kb不等，为双链、闭环的DNA分子，并以超螺旋状态存在于宿主细胞中。质粒主要发现于细菌、放线菌和真菌细胞中，它具有自主复制和转录能力，能在子代细胞中保持恒定的拷贝数，并表达所携带的遗传信息。

质粒载体

载体就是把一个有用的目的DNA片段通过重组DNA技术，送进受体细胞中去进行繁殖和表达的工具。质粒载体通常带有一个或一个以上的选择性标记基因(如抗生素抗性基因)和一个人工合成的含有多个限制性内切酶识别位点的多克隆位点序列，并去掉了大部分非必需序列，使分子量尽可能减少，以便于基因工程操作。就是一些常见的过表达基因质粒和敲低基因质粒。

如何获得大量目的质粒

质粒的转化

1.将目的质粒（3-5μl）加入到感受态细菌（50μl）中。（感受态细菌是商品化东西可以购买到）

2.将mix在冰上静置30分钟→42°，90秒→冰上静置180s

3.将其转移至LB培养基中（900μl），放置于恒温37°摇床中220rpm速度持续1小时

4.将液体按照8000 g 速度离心30秒