载体构建实例解析——构建 SETD3-pEGFP-N1（Snapgene 设计引物）

参考教程：
用 Snapgene 设计引物（视频教程）：
Snapgene官网
如何用 snapgene 软件构建质粒
真·snapgene 引物设计-满满的干货 不看血亏（此教程评论区有软件包地址）★★★
Snapgene 入门教程【官方】
SnapGene 快速入门，界面及常用操作教程
基因操作中该如何选择载体？
引物设计原则
Primer3web version 4.1.0
Primer3web 在线引物设计–2 分钟学会步骤极简的引物设计！
常用酶切位点表(含保护碱基)

普通PCR引物设计的优先选择顺序为 Primer-BLAST/Primer3 > Primer6 > Oligo7 > SnapGene >DNAMAN，分子克隆引物设计优先使用 SnapGene。

1. 下载目标基因 SETD3(human) CDS 序列文件：
   NCBI-gene 中搜索 SETD3 → 点击 人源 SETD3 基因→点击 NCBI Reference Sequences (RefSeq) → 点击 转录本 NM_032233.3 → 下拉页面点击 CDS → 点击 FASTA → send to (选择Complete Record, File, FASTA, Create File) 保存到本地 SETD3.fasta 。