GSVA+limma差异通路分析+发散条形图

Nat Med 的图是真的好看啊
GSVA+limma 差异通路的分析,主要参考:跟着 Nat Med. 学作图 | GSVA+limma差异通路分析+发散条形图,过程略去不谈。主要想说一下,其中之前没有搞清楚的点。

1 为什么使用limma包?

可以做差异的包有很多,EdgeRlimma 等等等等,为什么要用limma?
这个其实我也不知道,网上基本都是使用limma包的,等这阵子忙过去了,看看其他几个包为什么不能用。

2 为什么使用T值而不是logFC。

这点我认为有以下几点考虑,首先利用GSVA之后的数据进行差异分析后,logFC都很小,对于可视化来说不方便,因此使用T值可以较为方便的展示结果。
我们一般将阈值设为2, 也就是说 | T | >= 2 则认为差异是显著的,如果T小于0,则认为对于输入的分组顺序来说,下调。如果t大于0,则认为上调。(T值为负代表前面一组样本的均值低于后面一组的均值)
一般的:1.64<=|t|<1.96,表示在0.10显著性水平显著;1.96<=|t|<2.58,表示在0.05显著性水平显著;|t|>=2.58,表示在0.01显著性水平显著。
当然这是我自己的考虑,如果有不对的地方,希望可以不吝赐教。

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