fastq-dump的安装及使用方法

fastq-dump是大家经常使用的,主要是由于从NCBI中下载的数据格式大部分是SRA格式,此时就需要使用fastq-dump将SRA格式转换成为fasta格式

fastq-dump是sratoolkit软件中的一个功能,首先安装sratoolkit

打开ncbi官网,点击Download--Download Tools--

 

 点击Download,选择对应的版本

 获取sratoolkit的下载地址

wget https://ftp-trace.ncbi.nlm.nih.gov/sra/sdk/2.10.8/sratoolkit.2.10.8-centos_linux64.tar.gz

 

 sratoolkit安装和使用

tar zxvf sratoolkit.2.10.8-centos_linux64.tar.gz
cd sratoolkit.2.10.8-centos_linux64/bin
vdb-config -i #配置存储位置

配置环境变量,方便其在任何位置均可以使用

vi ~/.bashrc  #用vi/vim编辑器修改bashrc文件
i  #由command line进入insertion line
export PATH=$PATH:/home/urname/local/app/sratoolkit/bin
ESC, :wq  #退出vi编辑器并保存文件
source ~/.bashrc  #让配置生效

使用方法也相简单

prefetch SRR1036346 # SRR1036346为你想要获取的sra数据编号
# fastq_dump可将sra数据转化为fastq格式数据
fastq_dump --split-e SRR1036346.sra
# fasterq_dump支持多线程
fasterq_dump --split-3 SRR1036346.sra -e 10 -o SRR1036346
# 若为双端数据,则会产生两个数据,分别为SRR1036346_1.fastq 和 SRR1036346_2.fastq;若为单端数据,则只有一个数据,为SRR1036346.fastq.

我们一般使用fastq-dump的方式为

fastq-dump --split-3 SRR103346

双端测序结果将保存到一个文件里, 但是如果你加上--split-3之后, 他会把原来双端拆分成两个文件,但是原来单端并不会保存成两个文件. 另外,你用--gzip就能输出gz格式, 同时进行压缩。



 

对于生物信息学研究者来说,掌握SRA Toolkit中的fastq-dump和fasterq-dump命令,以下载和转码SRA格式数据至FASTQ格式,是进行转录组分析前的重要步骤。FASTQ格式文件不仅包含了测序的原始序列数据,还包括了每个碱基的Phred质量分数,这对于数据质控至关重要。 参考资源链接:[转录组质控与细胞器基因筛选:SRA Toolkit与fastq-dump实践](https://wenku.csdn.net/doc/50b1er6v54?spm=1055.2569.3001.10343) 首先,使用SRA Toolkit中的fastq-dump命令可以直接从SRA数据库下载数据,并将其转换为FASTQ格式。为了提高下载效率,可以使用fasterq-dump命令,它支持多线程处理,显著减少了处理大型SRA文件所需的时间。在执行命令时,需要指定SRA的访问号和输出文件的命名,例如: ``` fastq-dump --split-3 SRR1234567 ``` 或者使用fasterq-dump: ``` fasterq-dump --split-3 SRR1234567 -O output_directory ``` 其中`--split-3`选项用于将单端(single-end)数据拆分成多个文件,对于双端(paired-end)数据则需要使用`--split-3`和`-p`选项。 FASTQ格式文件的每一行都具有特定的含义,其中第三行包含质量分数,这些质量分数是基于每个碱基读取的错误概率计算得到的。Phred质量分数是以字符的形式表示碱基质量值的编码方式,它是一个十进制整数,通过公式Q = -10 * log10(P),其中P是单个碱基读取错误的概率。例如,如果一个碱基的质量分数是Q30,则表示该碱基有99.9%的概率被正确读取。 在进行转录组质控时,质量分数的高低直接关系到数据的质量。质量分数较低的碱基可能代表序列错误或测序错误,因此,需要通过质控工具过滤掉这些低质量的读段。常用的质控工具包括FastQC、Trimmomatic等,它们可以帮助识别和剔除质量分数低的序列,确保后续分析的准确性和可靠性。 在实际应用中,理解FASTQ格式文件中的质量分数,以及如何合理利用这些质量分数进行数据质控,对于转录组学研究至关重要。一旦获得了高质量的序列数据,研究人员就可以使用各种生物信息学工具进行进一步的分析,如基因表达量的计算、差异表达分析以及功能注释等。为了全面掌握这些技术,建议参考《转录组质控与细胞器基因筛选:SRA Toolkit与fastq-dump实践》这一资源,它将为读者提供深入的理论知识和实践指南,确保在转录组研究中取得可靠的结果。 参考资源链接:[转录组质控与细胞器基因筛选:SRA Toolkit与fastq-dump实践](https://wenku.csdn.net/doc/50b1er6v54?spm=1055.2569.3001.10343)
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