Sorafenib (Bay 43-9006) 是一种有效的口服活性 Raf 抑制剂 |MedChemExpress (MCE)

中文名：索拉非尼

CAS：284461-73-0

品牌：MedChemExpress (MCE)

存储条件：Powder: -20°C, 3 years; 4°C, 2 years.In solvent: -80°C, 6 months; -20°C, 1 month.

生物活性：Sorafenib (Bay 43-9006) 是一种有效的口服活性 Raf 抑制剂，对 的 IC50 分别为 6 nM 和 20 nM分别为 Raf-1 和 B-Raf。 Sorafenib 是一种多激酶抑制剂，对 VEGFR2、 的 IC50 分别为 90 nM、15 nM、20 nM、57 nM 和 58 nM >VEGFR3、PDGFRβ、FLT3 和 c-Kit。 Sorafenib 诱导自噬 和细胞凋亡。索拉非尼具有抗肿瘤活性。索拉非尼是一种铁死亡激活剂[1]。 IC50 和目标：IC50：6 nM (Raf-1)、20 nM (VEGFR-3)、22 nM (BRAF)、57 nM (PDGFR-β)、58 nM (Flt3)、68 nM (c-KIT)、 90 nM (VEGFR-2)[1] 

体外：Sorafenib (BAY 43-9006) 还抑制 BRAFwt (IC50=22 nM)，BRAFV599E (IC50=38 nM), VEGFR-2 (IC50=90 nM), VEGFR-3 (IC50=20 nM), PDGFR-β (IC=20 nM) >50=57 nM)、c-KIT (IC50=68 nM) 和 Flt3 (IC50=58 nM) 在生化分析中。在 MDA-MB-231 乳腺癌细胞中，索拉非尼完全阻断 MAPK 通路的激活。细胞与索拉非尼（0.01 至 3 μM）预孵育，并以剂量依赖性方式抑制基础 MEK 1/2 和 ERK 1/2 磷酸化（IC50，分别为 40 和 100 nM） [1].

体内：索拉非尼在一组人类肿瘤异种移植模型中表现出广泛的口服抗肿瘤功效。索拉非尼以 7.5 至 60 mg/kg 的剂量口服给药。与相应的对照组相比，任何治疗组都没有致死率，体重减轻也没有增加。在六种模型中的五种模型中，每日口服索拉非尼（30 至 60 mg/kg）可在治疗期间产生完全的肿瘤停滞[1]。二乙基亚硝胺 (DENA) 组的存活率为 73.3%，索拉非尼组为 83.3%，而正常对照组为 100%。与正常对照组相比，DENA 组肝脏指数显着增加（增加 1.51 倍，p<0.05），而与 DENA 组相比，索拉非尼治疗显示肝脏指数显着降低（p<0.05）。索拉非尼组肝脏指数显着降低至低于正常对照组[2]。

激酶试验：为了测试化合物对各种 RAF 激酶亚型的抑制作用，将索拉非尼添加到 Raf-1 (80 ng)、wt BRAF 或 V599E BRAF (80 ng) 与 MEK-1 (1 μg) 的测定缓冲液 [20 mM Tris] 的混合物中。 (pH 8.2)、100 mM NaCl、5 mM MgCl2 和 0.15% β-巯基乙醇]，终浓度为 1% DMSO。通过添加 25 μL 10 μM γ-[33P]ATP (400 Ci/mol) 启动 RAF 激酶测定（最终体积 50 μL），并在 32°C 下孵育 25 分钟。通过过滤到磷酸纤维素垫上收获磷酸化的 MEK-1，并使用 1% 磷酸洗去未结合的放射性。通过微波加热干燥后，使用 β 板计数器来量化过滤器结合的放射性[1]。

细胞试验：将 MDA-MB-231 人乳腺癌细胞系以每孔 2×105 个细胞的密度接种在 12 孔组织培养板的 DMEM 生长培养基（10% 热灭活的 FCS）中过夜。将细胞用无血清培养基洗涤一次，并在补充有 0.1% 无脂肪酸 BSA 的 DMEM 中孵育，其中含有不同浓度的 BAY 43-9006（0.01、0.03、0.1、0.3、1、3 μM）在 0.1% DMSO 中培养 120 小时。分钟测量基础 pMEK 1/2、pERK 1/2 或 pPKB 的变化。用冷 PBS（含有 0.1 mM 钒酸盐的 PBS）洗涤细胞，并在含有蛋白酶抑制剂的 1% (v/v) Triton X-100 溶液中裂解。通过离心澄清裂解物，进行 SDS-PAGE，转移至硝酸纤维素膜，用 TBS-BSA 封闭，并用抗 pMEK 1/2（Ser217/Ser221；1:1000）、抗 MEK 1/2、抗-pERK 1/2 (Thr202/Tyr204; 1:1000)、抗 ERK 1/2、抗 pPKB (Ser473; 1:1000) 或抗 PKB 一抗。印迹使用辣根过氧化物酶 (HRP) 偶联的二抗进行显色，并使用 Amersham ECL 试剂在 Amersham Hyperfilm[1] 上显色。

动物体内实验:小鼠[1] 使用雌性NCr-nu/nu 小鼠。荷有 75 至 150 mg 肿瘤的小鼠口服索拉非尼（7.5 至 60 mg/kg），每日给药，持续 9 天。在每个模型中，索拉非尼产生剂量依赖性肿瘤生长抑制作用，没有毒性证据，通过相对于对照动物的体重减轻增加或药物相关致死率来衡量。与抗肿瘤功效研究平行，另外四组荷有 100 至 200 mg 肿瘤的小鼠接受媒介物或索拉非尼（30 至 60 mg/kg）口服治疗，每日给药，持续 5 天，这是产生完整肿瘤的最短治疗持续时间治疗组中出现停滞。大鼠[2] 在该研究中，使用了 100 至 120 克的雄性白化大鼠。适应期后，对大鼠进行称重并随机分为三组：第1组（正常对照组；n=10）每天给予载体，持续8周。第2组（DENA组；n=15）接受腹膜内单剂量200mg/kg DENA。第3组（索拉非尼组；n=12）在DENA腹膜内注射后6周以每日10mg/kg的剂量口服索拉非尼，持续2周。实验结束时（8周），对大鼠进行称重，用乙醚麻醉，处死，并解剖其肝脏。将新鲜肝脏用冰冷的盐水洗涤两次，在干净的纸巾上擦干，并称重。肝脏指数计算为肝脏重量(g)/最终体重(g)×100。将肝脏分为五部分：一部分保存在10%福尔马林中用于组织病理学检查，另一部分立即冷冻在液氮中并保存在-80°C。

 参考详情：www.medchemexpress.cn/Sorafenib.html

参考文献：

[1]. Wilhelm SM, et al. BAY 43-9006 exhibits broad spectrum oral antitumor activity and targets the RAF/MEK/ERK pathway and receptor tyrosine kinases involved in tumor progression and angiogenesis. Cancer Res. 2004 Oct 1;64(19):7099-109.

[2]. El-Ashmawy NE, et al. Sorafenib effect on liver neoplastic changes in rats: more than a kinase inhibitor. Clin Exp Med. 2016 Apr 16.

[3]. Jin W, et al. Long non-coding RNA TUC338 is functionally involved in sorafenib-sensitized hepatocarcinoma cells by targeting RASAL1. Oncol Rep. 2017 Jan;37(1):273-280.

[4]. Li M, et al. Activation of an AKT/FOXM1/STMN1 pathway drives resistance to tyrosine kinase inhibitors in lung cancer. Br J Cancer. 2017 Aug 29.