文献来源:Fluorescent probes for organelle-targeted bioactive species imaging - Chemical Science (RSC Publishing)
一、 基于RONSS的探针设计:
1.基于ROS的探针设计:
ROS(包括, , , , , )可以扩散到细胞核内,调节许多关键的生理过程,而过量的ROS会导致DNA损伤/突变,破坏核内稳态。
1.1Chang课题设计的基于细胞核靶向的探针 :
通过筛选基于芳基硼酸盐的探针,Chang的研究小组发现了一个核靶向探针NucPE1,有趣的是,尽管没有特定的细胞靶向部分,但是这种探针可以在几种哺乳动物细胞系和秀丽隐杆线虫的细胞核中积累。此外,一旦NucPE1与细胞质中的反应,它就失去了靶向能力,这使得能够对细胞质内不含有的细胞核成像。
1.2Yi课题组设计的基于萘酰亚胺的探针:
Yi课题组设计的基于萘酰亚胺的探针通过和细胞核内的特定肽段结合实现对细胞核内的响应。共聚焦激光扫描显微镜实验表明,pepNP1的核定位成功,而未被NLS肽功能化的探针NP1保留在细胞质中。 可以用于用于HeLa细胞核内H2O2的比例成像,随着细胞核内的含量增多,荧光强度增强。
1.3 Chang课题组设计的基于Snap标签的H2O2探针:
Chang课题组设计的基于Snap标签的探针,可以和特定的AGT融合蛋白结合,SPG2从而进入细胞核利用细胞膜内的形成比率型探针,相较于未触发前的探针具有32倍荧光强度。
2. 基于RNS的探针设计:
2.1 Yang和Hu课题组设计的针对细胞核RNS靶向探针:
Yang和Hu课题组利用HaloTag技术开发了一种细胞器靶向探针(类似于Protac药物),通过和细胞内的Halo Tag蛋白结合从而进入细胞核,再通过细胞核内的ROS和RNS去PET屏蔽,并实现三唑仑的合成,实现从细胞质释放,再到细胞核红移的过程。
2.2 Xiao课题组设计的基于Snap标签的RNS探针:
通过将罗丹明衍生物与Snap标签底物连接,进入细胞核后蓝移,用于成像内源性亚细胞NO生成在LPS/IFN-g刺激的RAW264.7细胞的细胞核成像和依托opo苷处理的COS-7细胞的细胞核成像。