一、检测服务信息
1、检测方法:SYBR Green染料法
2、分析方法:相对定量
二、实验主要材料
1、主要仪器
2、主要试剂
三、实验操作
1、总RNA抽提
1)样品前处理
组织样本:取约100 mg样品至冷冻研钵中,加入液氮研磨至粉末状,转移至装有1 mL RNAiso Plus的1.5mL离心管中,振荡混匀后室温静置约5min。
2)相分离
每1mL RNAiso Plus加入0.2mL氯仿,振荡混匀15s后室温静置约3min,4℃,12000rpm,离心15min。
3)沉淀
转移水相至新的1.5mL离心管中,每1mL RNAiso Plus加入0.5mL异丙醇,混匀后室温静置10min,4℃,12000rpm,离心10min。
4)洗涤
弃上清,每加入1mL75%的乙醇,混匀后4℃,7500rpm,离心5m