生信分析-利用TBtools提取序列

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文章标签： 生物信息学
于 2021-10-24 10:43:02 首次发布
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版权

准备文件

  • gtf/gff3
  • 全基因组fasta

背景知识

CDS=coding sequence,是编码区，是可翻译成蛋白质的exon的集合
cDNA比CDS多了5’-UTR和3’-UTR区域，是所有exon的集合
gene就是所有exon+intron的集合啦

提取CDS

在这里插入图片描述

提取genome

在这里插入图片描述

提取cDNA

就是提取所有的exon啦
在这里插入图片描述

我是菜鸟www
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RNA-seq的生信分析可以使用R语言进行。下面是RNA-seq分析的大体步骤和对应的R语言代码： 1. 数据质控： - 质量评估和过滤：使用软件如FastQC和Trimmomatic对测序数据进行质量评估和过滤。 ```R library("ShortRead") library("Rsubread") # 质量评估 qc <- FastqFile("sample.fastq") quality <- qa(qc) # 过滤 filtered <- filterFASTQ(qc, output_file="filtered.fastq", trimVector=TRUE) ``` 2. 数据比对： - 将测序数据比对到参考基因组或转录组上，使用软件如HISAT2和STAR。 ```R library("Rsubread") # 比对到参考基因组 index <- buildindex("genome.fasta", "genome_index") aligned <- align(index, "filtered.fastq", output_file="aligned.bam") ``` 3. 确定基因表达水平： - 使用软件如featureCounts和HTSeq将比对结果转换为基因表达矩阵。 ```R library("Rsubread") # 生成基因表达矩阵 counts <- featureCounts("aligned.bam", annot.ext="gene.gtf", isPairedEnd=FALSE) ``` 4. 差异基因表达分析： - 使用软件如DESeq2和edgeR对基因表达矩阵进行差异基因分析。 ```R library("DESeq2") # 差异分析 dds <- DESeqDataSetFromMatrix(countData=counts, colData=sample_info, design=~condition) dds <- DESeq(dds) results <- results(dds) ``` 以上是RNA-seq生信分析的大体步骤和对应的R语言代码。请根据实际情况对代码进行相应的调整和优化。如果需要更详细的代码和解释，请参考相关的生物信息学教程和文献。
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