实验技术—测序数据不好，可能是建库出了问题？(上）

回顾

        在建库之前，我们需要对先前提取的核酸进行质检。只有质检合格的样本才能继续建库、测序、分析。（质检的内容在上一章节也有描述）这里再回顾下质检的内容主要分以下几部分：

1.  凝胶电泳实验: DNA是否降解 ，是否有其他的污染(跑胶， 与marker条带比较)

2. 紫外分光光度计测OD值: 检测提取DNA纯度情况（OD260/OD280比值约接近1.8，说明提取DNA纯度越高）

3. Qubit浓度定量。

DNA文库构建

常规基本的步骤有：1 DNA的片段化、2: 末端补平，3 端加A 、4  连接测序接头、5 PCR扩增和纯化。

01 DNA的片段化

        建库的第一步就是获得片段大小合适的DNA分子，那么就需要对DNA 进行打断.

问题：那么问题来了，DNA打断多少bp合适？

        1.取决于测序仪，比如准备上PE150, 那么打断的片段可以在300bp左右，比如上SE50,只要打断50~100bp即可；（这里没有理解的话，要和测序原理联系起来）

        2.取决测序的目的