TITLE:Toxicity evaluation,toxin screening and its intervention of the jellyfish Phacellophora camtschatica based on a combined transcriptome-proteome analysis
译名:基于转录组-蛋白质组数据联合分析对煎蛋水母毒性评价、毒素筛选及其干预
期刊:Ecotoxicology and Environmental Safety
日期:2022年2月
下载链接:
https://doi.org/10.1016/j.ecoenv.2022.113315
研究介绍
多组学技术的应用为解决海洋有毒水母的物种鉴定、毒素筛选和有效拮抗物构象等三大问题提供了新的研究视角。本研究对煎蛋水母(Phacellophora camtschatica)进行了一系列基于转录组-蛋白质组的分析,并进行了毒性评估。通过形态学观察和细胞色素c氧化酶亚基I(CO1)分子比对,鉴定样品水母为煎蛋水母。研究从成功构建的转录组和蛋白质组中共获得25747个unigenes和3058个蛋白质,其中注释到GO和KEGG数据库的基因分别有6869个(26.68%)和6618个(25.70%)unigenes,以及2536个(82.93%)和2844个(93.00%)蛋白质。水母体内致死作用明显,多器官功能指标和体外活性显著增加。研究者从120种毒素相关unigenes中筛选出62个,包括16种金属蛋白酶,11种磷脂酶等。此外,使用红细胞模型进一步筛选了11种毒素,其中锌金属蛋白酶nas-15样(1)最丰富。最后,地尔硫卓(Diltiazem)大大提高了ICR小鼠的存活率,而EDTA略微延长了ICR小鼠的存活时间。
材料与方法
材料:
在上海的一个人工水族箱搜集水母,然后将活物运送到实验室,进行实验。
方法:
(1)生物信息学分析
所有组装的unigenes都使用软件DIAMOND进行NR、SwissProt、GO、KEGG数据库注释,所有的蛋白质整合数据库都使用de novo组装的转录组进行注释。从构建的转录组中收集细胞色素c氧化酶亚基I(CO1)序列,或通过NCBI核苷酸数据库在构建了目标序列和比对序列的fasta文件后,通过Neighbor-joining聚类法在MEGA7中进行系统发育树绘制。毒素筛选是基于Blastx(核苷酸到蛋白质)对NR和Swissprot等数据库进行转录组和蛋白质组的筛选。通过管家基因GAPDH计算各毒性蛋白及其相关unigenes的表达水平。
(2)生存分析
ICR小鼠(20±2 g)被注入PBS-diluted触手提取物