教程 | 规模化物种同源基因分析 - orthofinder [上篇]

写在前面

基因组测序项目已然是几乎所有课题组都可以负担的水平。相比于几年前火爆的通过转录组测序挖掘生物学问题策略,通过基因组,尤其是比较基因组分析,往往可以给我们带来更多确定性结果,如相比于近源物种A为何物种B的果皮更红?这完全有可能是特定家族成员扩张导致。这些问题,转录组常常无法告诉我们,而基因组可以。接下来推出两份教程,来自课题组成员的投稿。我个人感觉还不错。与大伙一起学习。

同源基因分析介绍

开展生物信息数据分析的关键,并不在于软件使用,而在于了解自己在做什么。我们先厘清一些概念。
Q:什么是同源基因?

A:同源基因(homologs)主要分为直系同源(orthologs)和旁系同源(paralogs)。在远古时候,祖先物种只带有一个珠蛋白基因(early globin genes),经过N年的环境选择,现存的物种都具有两个珠蛋白基因,分别为α-链和β-链的类型。青蛙-人类-鼠的α-链球蛋白基因,三个并称为直系同源基因,而蛙的α链和β链球蛋白基因则称作旁系同源基因。
Q: 同源基因分析可以做什么?
A: 较短时间下,获得同源基因集合(Orthogroups)和 有根物种树(基于Orthogroups内基因推断的)的信息。具有这些信息,后续可以

OrthoFinder是一种常用的基于直系同源基因构建物种树的工具,它可以高效地从大规模的基因组数据中找到同源基因,进而构建物种树。下面是利用OrthoFinder进行物种树构建的基本步骤: 1. 数据预处理:将待分析的多个物种基因组数据进行处理,包括基因注释、去除低质量序列、去重、序列比对、格式转换等。 2. 安装和运行OrthoFinder:安装OrthoFinder并按照指导文档进行运行。OrthoFinder的输入文件为每个物种的蛋白质序列文件,输出文件为每个同源基因簇的序列文件和一个物种树文件。 3. 同源基因簇的筛选:根据OrthoFinder输出的同源基因簇的序列文件,筛选出包含所有物种同源基因簇,并将其进行多序列比对和序列编辑。 4. 构建进化距离矩阵:根据同源基因簇的多序列比对结果,利用序列编辑软件计算不同物种之间的进化距离,并将其记录在一个进化距离矩阵中。 5. 构建系统发育树:将进化距离矩阵作为输入,使用系统发育树构建软件构建物种树。 6. 验证树的可靠性:对于构建出来的物种树,需要进行Bootstrap方法、Jackknife方法等进行可靠性验证。 以上是利用OrthoFinder进行物种树构建的基本步骤。需要注意的是,OrthoFinder的结果可能会受到多个因素的影响,如同源基因筛选的严格程度、序列比对的准确性、进化距离计算的方法等。因此,需要进行多次分析和验证,以得到可靠的结果。
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