Chip-seq数据分析处理流程

一、处理过程

要处理 SRR14879780 的 ChIP-seq 数据并进行基序分析(包括比对到参考基因组 hg38.fasta 和峰值调用),你可以按照以下步骤操作,并使用相应的代码。每个步骤会涉及一些常用的生物信息学工具,如 FastQCTrim GaloreBowtie2samtoolsMACS2MEME-ChIP

1. 准备环境

你需要先安装必要的工具,如 Bowtie2samtoolsMACS2MEME-ChIP。你可以使用 conda 来安装这些工具:

# 使用conda安装工具
conda install -c bioconda fastqc trim-galore bowtie2 samtools macs2 meme

2. 下载数据

首先,下载你需要的原始 SRA 数据hg38 参考基因组

# 下载sra数据并转换为fastq文件
prefetch SRR14879780
fastq-dump  SRR14879780.sra
fasterq-dump SRRxxxxxx #比 fastq-dump 更快速的工具,适用于大数据集。


# 下载hg38参考基因组并建立索引
wget https://hgdownload.soe.ucsc.edu/goldenPath/hg38/bigZips/hg38.fa.gz  #下载hg38
gunzip GCF_000001405.40_GRCh38.p14_genomic.fna.gz  #解压下载的fasta文件
samtools faidx hg38.fa  #为fasta文件建立索引
less hg38.fa  #查看fasta文件

(可选)数据质量控制分析

# 质控分析
fastqc SRR14879780_1.fastq

可以生成测序数据的质量特征报告,比如碱基质量分布、GC 含量、序列长度分布等

(可选)数据修剪

在对数据进行处理前,先检查测序数据fastq的质量,使用 FastQC 进行质控分析:

# 使用Trim Galore修剪低质量reads
trim_galore --paired --fastqc --length 50 input_R1.fastq input_R2.fastq

  • --paired 表示处理双端测序数据。
  • --fastqc 表示在修剪后生成FastQC报告以评估数据质量。
  • --length 50 表示保留长度至少为50bp的reads。

这里之所以有两个输入文件,是因为双端测序会产生两对末端测序数据,一个是前向读取一个是后向读取。

(可选)用 bedt

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