显微物镜的分辨率

介绍怎么去计算显微物镜的分辨率或者说是分辨能力，在现有的显微物镜的标识中，都会标明这一项参数，这项参数对于显微物镜的设计和选取来说都至关重要；

目录

一、标识

二、显微物镜的分辨率的计算

三、一些理论历史

1、George Biddell Airy与‘艾里斑’（1835）

2、Ernst Abbe与‘Abbe衍射极限’（1873）

3、John William Strutt与‘瑞利判据’（1896）

四、如何计算显微镜的分辨率

*写给自己*

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一、标识

光学显微镜的分辨率定义为标本上两点之间的最短距离，观察者或相机系统仍可将其区分为单独的实体。
所以有用之间的距离d去表示，也有用R去表示，以及δ标识，都是显微物镜的分辨率标识；
 

二、显微物镜的分辨率的计算

具有三个计算公式

分辨率（r）=λ/（2NA）
分辨率（r）=0.61λ/ NA
分辨率（r）=1.22λ/（NA（obj）+ NA（cond））

其中r是分辨率（两个物体之间的最小可分辨距离），NA是显微镜数值孔径的总称，λ是成像波长，NA（obj）等于物镜数值孔径，NA（cond）是聚光镜数值孔径。注意，方程（1）和（2）由所述乘法因子，这是0.5方程不同（1）和0.61方程（2）。这些方程式基于许多因素（包括光学物理学家所做的各种理论计算）来说明物镜和聚光镜的行为，因此不应视为任何一项一般物理定律的绝对值。在某些情况下，例如共聚焦和荧光显微镜，分辨率实际上可能超过了这三个方程式中的任何一个所设定的极限。其他因素，例如较低的样品对比度和不适当的照明，可能会降低分辨率，并且往往会降低r的实际最大值（使用550纳米的中光谱波长，约为0.25 μm），并且数值孔径为在实践中无法实现1.35至1.40。下表（表1）提供了一个列表的分辨率（ř）和数值孔径（NA）值进行物镜放大和校正。

当显微镜完全对准并且物镜与次级聚光镜适当匹配时，我们可以将物镜的数值孔径代入方程式（1）和（2），将方程式（3）简化为方程式（2）。要注意的一个重要事实是，在任何这些方程式中，放大率都不是一个因素，因为只有数值孔径和照明光的波长才能确定样品的分辨率。

正如我们已经提到的（在等式中可以看到的），光的波长是显微镜分辨率的重要因素。较短的波长产生较高的分辨率（r的较低值），反之亦然。光学显微镜中最大的分辨力是通过近紫外光实现的，这是最短的有效成像波长。近紫外光之后是蓝色，然后是绿色，最后是红色，可以分辨出样品的细节。在大多数情况下，显微学家使用钨卤素灯泡产生的白光照亮样品。可见光谱的中心位于约550纳米，这是绿光的主要波长（我们的眼睛对绿光最敏感）。表1中就是用来计算分辨率值的波长。数值孔径值在这些方程式中也很重要，数值孔径越高，分辨率也越高。在固定数值孔径（0.95）下，光波长对分辨率的影响；

显微镜的分辨能力是光学系统的最重要特征，并且会影响区分特定样本精细细节的能力。如上所述，确定分辨率的主要因素是物镜的数值孔径，但是分辨率还取决于样本的类型，照明的相干性，像差校正的程度