你好就是关于建库测序存在疑问,我看网上有一种链特异性建库,把cDNA第二链降解然后扩增,那扩增过程中不就又有二链了吗,怎么知道的方向性?
链特异性建库方式(以目前最常用的dUTP为例,如下图所示)
首先利用随机引物合成RNA的一条cDNA链,
在合成第二条链的时候用dUTP代替dTTP,加adaptor后用UDGase处理,将有U的第二条cDNA降解掉。
你好就是关于建库测序存在疑问,我看网上有一种链特异性建库,把cDNA第二链降解然后扩增,那扩增过程中不就又有二链了吗,怎么知道的方向性?
链特异性建库方式(以目前最常用的dUTP为例,如下图所示)
首先利用随机引物合成RNA的一条cDNA链,
在合成第二条链的时候用dUTP代替dTTP,加adaptor后用UDGase处理,将有U的第二条cDNA降解掉。