nohup fastq-dump --gzip --split-files SRR18505384 SRR18505385 SRR18505386 SRR18505390 2>&1 &
使用--split-3参数不管用,无法将SRA文件分为双端fastq(不知道为什么),改用--split-files管用了,但是生成了3个fastq文件,我懵逼了,问了一下机器人,得到解答如下:
在使用`fastq-dump`命令处理SRA文件时,生成的3个FASTQ文件对应于原始SRA文件中的不同部分。这三个文件分别是:
1. **Read 1(R1)文件**:此文件包含测序实验的第一条读取(read)的测序数据。在Illumina测序中,它通常包含DNA片段的前端序列。这个文件的名称通常以"_1.fastq"或"_R1.fastq"结尾。
2. **Read 2(R2)文件**:这个文件包含了测序实验的第二条读取(read)的测序数据。在Illumina测序中,它通常包含DNA片段的反向互补序列。这个文件的名称通常以"_2.fastq"或"_R2.fastq"结尾。
3. **Unpaired文件**:这个文件包含了在测序实验中无法匹配到配对序列的读取(read)的测序数据。在Illumina测序中,由于测序错误或片段长度不足等原因,可能会出现一些读取无法与其配对的情况。这个文件的名称通常以"_unpaired.fastq"结尾。
通过生成这三个文件,可以保留并处理SRA文件中的所有测序数据,包括配对的读取(read)和未配对的读取(read),以便进一步的分析和处理。
对于下游的Cell Ranger分析,你应该使用前两个文件,即Read 1(R1)文件和Read 2(R2)文件。
Cell Ranger是10x Genomics开发的分析流程,用于处理单细胞RNA测序数据。在单细胞RNA测序中,通常使用双端测序技术,其中每个细胞的mRNA转录本被逆转录成cDNA,并通过Illumina测序仪进行两次测序,分别获得Read 1和Read 2的测序数据。
Cell Ranger的输入是原始的双端测序的FASTQ文件,因此你应该使用`fastq-dump`命令生成的R1和R2文件,这两个文件包含了双端测序数据的配对读取(read)。
请注意,如果你使用的是单端测序数据,只有一个FASTQ文件,你应该使用该文件进行Cell Ranger分析。但是,对于双端测序数据,你需要提供两个配对的FASTQ文件(R1和R2)作为Cell Ranger的输入。