2021.04.22【RNA-seq流程】丨count值转换为FPKM值优化2.0

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  • 优化内容
    • 解决每次转换需要设置样本数和基因数目
    • 实现基因count值与length精准匹配
  • 摘要
    • 大概半年前,我写过一篇将HTseq生成的基因COUNT值转换为FPKM值文章,用于对count的入门级均一化处理。随着项目越做越多,逐渐发现了之前写的脚本的局限性。比如,每次换算都需要设置包括样品数,基因数目等参数。另外,以前的转换脚本哪怕使用同一个gff文件,定量得到的基因数目和makeTxDbFromGFF中exonsby、transcriptsby定义的基因数目可能是不一样的,这就导致count列和length列不能一一对应进行计算,而产生差错。count如何精准换算成FPKM就成了非常重要的一个问题。因此,我用了2天时间(R确实不太熟悉)研究了多个解决方法, 最后通过匹配方式将gene_count与gene_length通过gene名称匹配起来,完成转换。
  • 环境配置
    • R version 3.6.1
    • 依赖包GenomicFeatures
  • 研究思路
    • 最开始的方向是尝试统一基因数目,比如将htseq和makeTxDbFromGFF读取相同的gtf或者gff文件。在发现有不少其他类型的注释后&#x
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